荧光显微镜是利用样品发出的荧光来获取显微图像的一种显微镜。在荧光显微镜中,滤光片的作用是选择性地透过激发光和荧光光之间的波长差异,以增强样品的荧光信号,并减少非特异性的背景荧光。
荧光显微镜滤光片通常由多个滤光片组成,每个滤光片都有特定的波长范围和颜色。
下面是一些常见的荧光显微镜滤光片和它们的波长和颜色:
激发滤光片(excitation filter):这种滤光片选择性地透过激发光的波长范围,通常是蓝色或紫色。它的作用是激发样品中的荧光染料,使其产生荧光信号。激发滤光片的波长范围通常在400-500 nm之间,可以选择性地传递特定波长的光线用于激发样品中的荧光染料。常见的激发滤光片包括蓝色滤光片(波长约为470纳米)和绿色滤光片(波长约为546纳米)。
二向色镜(dichroic mirror):这种滤光片选择性地反射激发光的波长,同时透过样品发出的荧光光信号。二向色镜滤光片的波长范围通常在500-550 nm之间。
发射滤光片(emission filter):这种滤光片选择性地透过样品发出的荧光光信号,同时阻挡非特异性的背景荧光。发射滤光片的波长范围取决于所使用的荧光染料。
有些荧光显微镜还配有衰减片,衰减滤光片可以控制激发光线的强度。它们通常与激发滤光片一起使用,以确保样品接收到适当的激发光强度。衰减滤光片的颜色通常与激发滤光片的颜色相同。
通过合理的组合和选择,荧光显微镜滤光片可以实现高灵敏度和高分辨率的成像,同时减少背景干扰和杂散信号,荧光滤光片的波长和颜色通常与荧光染料的发射波长和颜色相对应。常见的荧光滤光片包括蓝色滤光片(波长约为450nm)、绿色滤光片(波长约为510nm)和红色滤光片(波长约为600nm)。